密度梯度离心,又称为速率区带离心,是沉降系数较接近的物质分离的方法。
工作原理:不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
介质梯度应预先形成,介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。
常用介质:蔗糖、甘油;
密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度;
具体操作流程:离心前将样品小心铺放在密度梯度溶液表面,离心形成区带。离心后不同大小、不同形状、有一定沉降系数差异的颗粒在密度梯度液中形成若干条界面清楚的不连续区带;
应用范围:可用来分离核酸、蛋白质、核糖体亚基及其它成分。
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