在近期的核酸检测中,基因扩增实验室的建设越来越得到重视,因为它对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到了至关重要的作用。基因扩增实验室即PCR实验室,是一种分子生物学技术,其特点是能将微量的DNA大幅增加。PCR实验室主要可分为四个区域。
PCR实验室平面图:
1、试剂准备室
该区域的功能是贮存实验试剂的制备、实验试剂的分装、主反应混合液的制备。注意事项是实验项目所采用的材料,如实验试剂与实验试剂原料,标本与标本原料等,这些都务必储放于本区域内。对于是否需要调节气流压力,该区域没有严格规范。它的主要仪器设备有:超净台、加样器、混匀器、纯水机、消毒车、天平和离心机等,加样器、天平不仅要专用外,还应该有定期进行校正,试剂分装应在超净台中开展,扩增反应混合液应采用分子生物学级别的,实际制备好后应该有质检,一是看有没有污染、二是看检测试剂的扩增实际效果。
2、样品制备室
该区域的功能是临床标本的储存、核酸(RNA与DNA)的提取与贮存、核酸加入至扩增反应管和测量RNA时DNA的合成。注意事项是为了避免 相邻板块的空气进到本区,压力梯度对比相邻板块要设置成正压。开展实验项目的操作时,工作人员要防止多余的走动,以避免 加样操作中产生气溶胶污染。它的主要仪器设备有:安全柜、加样器、消毒车、冰箱、水浴锅、生物安全柜、离心机、混匀器。
3、扩增室
该区域的功能是DNA扩增、把制备的实验试剂制成反应混合液。注意事项是试验扩增的污染指数相对较高,压力梯度相比邻近板块要设置成负压,这样做的优势是能合理避免气溶胶从本区泄漏。它的主要仪器设备有:消毒车、PCR仪、离心机、可移动紫外灯、微量加样器,PCR仪需要进行校准,并制备UPS电源,以避免因为电压的波动,断电对扩增效果的不良影响。
4、产物分析室
此区域的功能是检测相关扩增片段。注意事项是实验室设计时如果已经预置了全自动封闭分析仪器,那么就没有必要再划分本区了。本区的压力梯度相比邻近区域要设置成负压,这样做的优势是能合理避免 扩增物质扩散至其它区域。该区域的主要仪器设备有:消毒车、电泳仪、超净台、电热板、成像仪、杂交仪、凝胶。
以上就是一个完整的PCR实验室的设备区域构成,在进行PCR操作时,操作人员一定要严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染事故的发生。
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